参数:
指标名称 | 指标 |
外观 | 乳白色半透明球状颗粒 |
配基 | Protein G |
基球 | 4%高交联琼脂糖 |
动态载量(mgIgG/mL) | 20 |
平均粒径(μm) | 90 |
运行流速(cmh) | ≤500 |
工作温度(℃) | 4-40 |
耐压( MPa) | 0.3 |
pH稳定性 | 2-9(工作);2-10(CIP) |
化学稳定性 | 常用的水相缓冲液,6M盐酸胍,1%SDS,70%乙醇,8M尿素 |
储存 | 20%乙醇 |
简介:
Protein A是一种发现于金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的细胞壁表面蛋白,分子量为42kDa;Protein G是C型或G型链球菌(Streptococcal bacteria)表达的免疫球蛋白结合蛋白。Protein A和Protein G功能相似,能特异性地与哺乳动物免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)结合,结合的部位通常为免疫球蛋白的Fc区,但有资料显示Protein A也会和人VH3家族的Fab区结合,而Protein G有时与Fab区也有一定结合。同时,两者对于不同的免疫球蛋白亚类的结合能力有所不同。适当重组改造的Protein A、G与琼脂糖凝胶(agarose)以一定的方式结合,可用于免疫沉淀或抗体的纯化。
使用本品经过一步亲和层析,即可从样品中得到高纯度的抗体,应用广泛。本产品为即用型预装柱,适合于培养液、血清、腹水或杂交瘤细胞培养上清中的IgG的纯化,或含Fc片段的重组蛋白的纯化。Protein A+G Agarose适合于免疫沉淀所有Protein A Agarose和Protein G Agarose单独可以免疫沉淀的抗体,包括human IgG1、IgG2、IgG3、IgG4,mouse IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3,rat IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c,rabbit IgG,rabbit、goat多克隆抗体。
下表是爱达斯Protein A、Protein G产品与小鼠、大鼠、山羊、鸡、人、兔子常见的免疫球蛋白亚类的结合能力及不同物种的总结合能力情况表。
物种 | Ig | Protein A | Protein G |
鼠 | IgG1 | + | ++ |
IgG2a | ++++ | + | |
IgG2b | / | / | |
IgG3 | / | / | |
大鼠 | IgG1 | - | + |
IgG2a | - | + | |
IgG2b | / | / | |
IgG3 | / | / | |
山羊 | IgGs | - | + |
鸡 | IgY | - | - |
人 | IgG | ++++ | ++ |
兔子 | IgG | ++++ | ++ |
本预装柱中使用的Protein A和Protein G为重组蛋白,特异性强。本产品中的重组Protein A和Protein G可与多数哺乳动物IgG的Fc端特异性结合,分子量分别为34.8kDa和22.5KDa。该重组Protein A和Protein G通过改造,仅保留了与IgG Fc端结合相关的氨基酸序列,去除了结合位点以外可能导致非特异性结合的序列,从而可以有效减少非特异性结合。每个Protein A分子和Protein G分子可分别结合5个和2个IgG分子。
本预装柱中的琼脂糖物理化学稳定,有相对较高的线性流速。本产品中的Protein A和Protein G共价连接到4%的高交联度、高流速琼脂糖(cross-linked, 4% Agarose, Fast Flow)上,并按1:1比例混合。每毫升Protein A+G agarose beads (沉淀物)中共偶联有约4mg的重组Protein A和Protein G。每毫升Protein A+G agarose beads (沉淀物)可以结合约18-50mg human IgG。本产品中agarose beads的平均直径为90μm,蛋白纯化时的推荐线性流速为50-400cm/h,耐压指数为0.008MPa。
本预装柱可重复次数多。本预装柱再生后,重复使用3-5次几乎不影响其结合能力。
本预装柱具有标准接口,使用方便。本类型的预装柱为高纯度聚丙烯柱体,低吸附,规格有1ml和5ml两种,鲁尔接口,可适配商品化的各类中压液相纯化系统,如ÄKTA系统(也被称为AKTA系统)等;如果使用注射器或蠕动泵,需要相应的接头进行连接,否则容易出现预装柱内部压力过高而导致推不动甚至漏液的情况,如果没有相应的接头,不推荐连接注射器或蠕动泵使用。
本类型的预装柱有1ml和5ml两种,相应的体积为Protein A+G Agarose在预装柱中压实后的体积,并保存在20%乙醇溶液中。
保存条件:
4ºC保存,一年有效。请勿冷冻。