简介:
BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒是一种用于免疫组化显色、 Western等膜显色和诱导多功能干细胞iPS鉴定等的试剂盒。
BCIP/NBT是碱性磷酸酯酶的常用底物。在碱性磷酸酯酶的催化下,BCIP会被水解产生强反应性的产物,该产物会和NBT发生反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。 Ø
本试剂盒可以用于细胞或组织的碱性磷酸酯酶显色包括诱导多功能干细胞iPS的鉴定,也可以用于Western等结合有碱性磷酸酯 酶的膜的显色检测。同时也可以用于细胞或组织内源性的碱性磷酸酯酶显色。 Ø
保存条件:
4ºC保存,一年有效。BCIP溶液和NBT溶液需避光保存。
注意事项:
BCIP对人体有刺激性,操作时请小心,并注意适当防护以避免直接接触人体或吸入体内。NBT对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
Ø 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
Ø 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. 对于组织切片或细胞样品或膜,在与碱性磷酸酯酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后,用适当洗涤液洗涤3-5次,每次3-5分
钟。对于检测内源性碱性磷酸酯酶的组织或细胞样品,在适当固定后,也用适当洗涤液洗涤3-5次,每次3-5分钟。
2. 按照如下比例依次加入各溶液,混匀后即配制成BCIP/NBT染色工作液:
碱性磷酸酯酶显色缓冲液 | 3ml | 10ml |
BCIP溶液(300X) | 10μl | 33μl |
NBT溶液(150X) | 20μl | 66μl |
BCIP/NBT染色工作液 | 3.03ml | 10.1ml |
3. 最后一次洗涤完毕后,去除洗涤液,加入适量BCIP/NBT染色工作液,确保能充分覆盖样品。
4. 室温避光孵育5-30分钟或更长时间(可长达24小时),直至显色至预期深浅。
5. 去除BCIP/NBT染色工作液,用蒸馏水洗涤1-2次即可终止显色反应。
对于组织切片或细胞样品,显色反应终止后,如有必要可以用中性红染色液(neutral red staining solution)染色,以便于观察。对于膜,显色反应终止后,可以室温晾干避光保存。